真菌基因組DNA提取的介紹
更新時間：2025-10-24 | 點擊率：361
真菌基因組DNA提取是分子生物學研究中的基礎實驗技術，其質量直接影響后續實驗(如PCR、測序等)的成功率。由于真菌細胞壁厚且結構復雜，提取過程需兼顧裂解效率與DNA純度。其核心目標是從真菌的菌絲體、孢子或子實體中，分離獲得高純度、高完整性的基因組 DNA，用于后續 PCR 擴增、基因克隆、測序等實驗。
真菌基因組DNA提取的核心邏輯的是：破碎細胞壁→釋放核酸→去除蛋白質/ 多糖/色素等雜質→純化 DNA→洗脫回收。
破壁：利用物理、化學或酶解方法破壞堅硬的細胞壁和細胞膜，使胞內 DNA 釋放到緩沖液中；
去蛋白：通過蛋白酶K降解蛋白質，或用酚 / 氯仿抽提去除蛋白質雜質；
去多糖/色素：利用高鹽溶液、吸附柱特異性結合等方式，分離 DNA 與真菌有的大量多糖(易與 DNA 共沉淀，影響后續實驗)；
純化：通過乙醇 / 異丙醇沉淀或硅膠柱吸附，獲得純凈的 DNA；
洗脫：用低鹽緩沖液(如 TE 緩沖液)或超純水溶解 DNA，便于保存和使用。
操作規范：
低溫操作：離心和保存步驟需在4℃或冰上進行，防止DNA降解。
避免機械剪切：輕柔混勻，防止DNA斷裂。
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