技術(shù)文章
當(dāng)前位置：首頁 > 技術(shù)文章
-
吖啶橙染色原理
2017-07-06吖啶橙熒光染色法基本原理：吖啶橙（acridineorange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結(jié)合后發(fā)不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細(xì)胞又可染固定原代細(xì)胞。用于直接染色觀察活原代細(xì)胞或固定染色觀察原代細(xì)胞均可。吖啶橙對活原代細(xì)胞毒性小，配成1×...
-
佛波酯PMA應(yīng)用實例（僅作參考）
2017-06-21PMA（同義名：TPA）是一種廣泛用于體內(nèi)外實驗的佛波酯(phorbolester)PKC激活劑。PMA結(jié)合PKC(Ki=2.6nM)并激活其功能，在細(xì)胞和組織中都呈現(xiàn)出極其廣的抑制譜。PMA可以抑制Fas誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，但又可以誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞的凋亡。PMA在肝細(xì)胞中可以誘導(dǎo)iNOS的表達(dá)。PMA可以增強forskolin誘導(dǎo)的cAMP形成。PMA是一種...
-
DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點有哪些
2017-06-21DNA聚合酶是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶，目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ，都與DNA鏈的延長有關(guān)。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點：都能以DNA為模板，從5'向3'進(jìn)行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應(yīng)。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點：1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶...
-
LB培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基的比較與區(qū)別
2017-06-16我們都只lb培養(yǎng)基與ms培養(yǎng)基成分和用途都有很大不同。那么他們區(qū)別到底在哪呢，下面就給你詳細(xì)介紹。一、LB培養(yǎng)基LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基，根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼（GiuseppeBertani）的說法，這個名字來源于英語的lysogenybroth，即溶菌肉湯。1．用途一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種，使菌種成倍擴增，達(dá)到使用要求，可分為液體...
-
索萊寶抗體新發(fā)布（NFKB1 Antibody）
2017-06-15NFKB1AntibodyRabbitPolyclonal|Catalognumber:K002146PApplications:WBIHCIFIP|Speciesspecificity:HumanWesternblotanalysisofextractsofvariouscelllines,usingNFKB1antibody.Immunoprecipit...
-
原位雜交實驗操作步驟
2017-04-26一質(zhì)粒制備1質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和擴增1.1制備XL1-Blue感受態(tài)細(xì)菌1.取400uLXL1-Blue菌種加入到含200mllb培養(yǎng)基的錐形瓶中，37℃、100rpm培養(yǎng)4h，離心，倒置，以冰冷的0.1mol/LCaCl_2重懸細(xì)菌，冰浴30min，離心，棄上清，倒置，再加4ml(含15%甘油)冰冷的CaCl2重懸細(xì)菌，分裝(200μ/tube)，-80℃保存。2...
-
瓊脂糖凝膠中回收基因片段
2017-04-19實驗原理限制性內(nèi)切酶切割后的DNA*片斷經(jīng)過電泳后，按分子量大小被分開，排列在瓊脂糖凝膠中，可以將特定的某條DNA帶所在的凝膠切下來，加熱或用特殊的試劑熔解凝膠，使DNA溶回到溶液中，再經(jīng)過乙醇沉淀或過柱即可獲得目的DNA酶切片段。實驗試劑1.電泳緩沖液2.熒光染料3.電泳級瓊脂糖粉4.10′加樣緩沖液5.DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)(DL2000)6.DNA凝膠回收試...
-
基因診斷的概念、常用技術(shù)與應(yīng)用
2017-04-06基因診斷的概念一、基本概念：1．人類的絕大多數(shù)疾病都與基因有關(guān)，基因變異引起疾病兩種類型：1)內(nèi)源基因變異：由于先天遺傳和后天內(nèi)外環(huán)境因素的影響，人類的基因結(jié)構(gòu)及表達(dá)的各個環(huán)節(jié)都可發(fā)生異常，從而導(dǎo)致疾病。分基因結(jié)構(gòu)突變和表達(dá)異常。2)外源基因的入侵：各種病原體感染人體后，其特異的基因被帶入人體并在體內(nèi)增殖引起各種疾病?；蚋淖円鸶鞣N表型改變，從而引起疾病，...
-
透析袋的選擇和使用方法
2017-03-31透析袋簡介透析技術(shù)自ThomasGraham于1861年發(fā)明到現(xiàn)在已有一百多年的歷史，它已成為生物化學(xué)實驗室簡便，常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，去除鹽、少量有機溶劑、小分子雜質(zhì)、樣品濃縮和改變微量樣品的緩沖系統(tǒng)等都要用到透析技術(shù)。生物樣品的透析只需使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，浸入水或緩沖液中...
-
Protein Marker 預(yù)染蛋白Marker
2016-08-26ProteinMarker蛋白Marker預(yù)染蛋白Marker，26623，26614,26616,26617,26619,26620，26610，26612，26634，26628因ThermoScientific公司產(chǎn)品線整合，原FermentasProteinMaker產(chǎn)品線將整合入Pierce產(chǎn)品線，產(chǎn)品內(nèi)、外包裝以及標(biāo)簽均會發(fā)生微小變化，但產(chǎn)品仍然...
-
Science:美億萬富翁斥巨資探尋癌癥免疫新療法
2016-05-03一名科技企業(yè)家能否提出開展癌癥研究的更好方法?這是納普斯特聯(lián)合創(chuàng)始人、億萬富翁慈善家SeanParker日前下的賭局。Parker將2.5億美元注入一家研究癌癥免疫療法的新機構(gòu)。相比之下，美國副總統(tǒng)*的“癌癥登月”計劃提議的經(jīng)費是向國立衛(wèi)生研究院(NIH)國家癌癥研究所撥款6.8億美元。不過，這一數(shù)目可能是年度資助水平，后續(xù)幾年將持續(xù)進(jìn)行。Parker想在利...
-
丙烯酰胺凝膠電泳
2016-03-16聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的電泳方法。在這種支持介質(zhì)上可根據(jù)被分離物質(zhì)分子大小和分子電荷多少來分離。聚丙烯酰胺凝膠有以下優(yōu)點：①聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和N，N'甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝膠有格子是帶有酰胺側(cè)鏈的碳-碳聚合物，沒有或很少帶有離子的側(cè)基，因而電滲作用比較小，不易和樣品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成的...
-
RNAi技術(shù)新突破：根據(jù)SNP選擇性沉默突變基因
2016-03-16對于某些遺傳病而言，從雙親繼承一個拷貝的突變基因就足以致病?，F(xiàn)在，愛荷華大學(xué)的研究人員證明有可能在沉默一個基因的突變拷貝的同時不影響另一個正常拷貝的表達(dá)。這一發(fā)現(xiàn)表明有一天基因沉默技術(shù)或許可以用于多種人類疾病的治療，包括癌癥、亨廷氏癥及類似遺傳病、病毒感染等，治療這些疾病都需要選擇性關(guān)閉某些引起麻煩的基因的表達(dá)。應(yīng)特別指出的是，愛荷華大學(xué)的研究人員沉默突變基...
-
培養(yǎng)細(xì)胞染色體顯示法
2016-03-161、植物組織蛋白質(zhì)提取方法1、根據(jù)樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液，可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入），準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時）。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）...
-
蛋白質(zhì)提取的方法總匯
2016-03-161、植物組織蛋白質(zhì)提取方法1、根據(jù)樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液，可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入），準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時）。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）...